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自2006年以來，我們一直利用定制生產(chǎn)的蛋白質(zhì)推動研究取得成功，并期待提供高質(zhì)量的蛋白質(zhì)來幫助您實現(xiàn)研究目標。
RayBiotech的蛋白質(zhì)生產(chǎn)服務(wù)有:
○ 全面——我們可以為您提供從基因合成到蛋白質(zhì)純化等各個方面的幫助。我們的服務(wù)包括脫鹽、等分、凍干和結(jié)合。
○ 快速——您將在3周內(nèi)獲得細菌表達的蛋白質(zhì)，在6-8周內(nèi)獲得昆蟲表達的蛋白質(zhì)，在3-6周內(nèi)獲得哺乳動物表達的蛋白質(zhì)。
○ 易于擴展——首次純化蛋白質(zhì)后，我們可以根據(jù)需求擴大培養(yǎng)以獲得您所需要的蛋白量。
○ 高品質(zhì)——純度經(jīng)SDS-PAGE測定，我們通常達到>95%的純度。
○ 無風(fēng)險——我們分階段推進項目。您將收到每個階段的進展通知。您只需為成功完成的里程碑付費。
○ 價格實惠。
準備好讓我們開始開發(fā)您的重組蛋白服務(wù)了嗎？
請求報價| 細菌 |
昆蟲細胞 (桿狀病毒) |
動物細胞 (TruExp?) |
|
|---|---|---|---|
| 概況 | 細菌基因表達是一種快速且經(jīng)濟高效的生產(chǎn)重組蛋白的方法。 | 桿狀病毒昆蟲細胞基因表達易于從實驗室擴大到大規(guī)模生產(chǎn)系統(tǒng)。然而，盡管表達的蛋白質(zhì)具有豐富的PTM，但修飾的類型和模式與在哺乳動物系統(tǒng)中表達相同蛋白質(zhì)時所見的不同。 | 哺乳動物基因表達是產(chǎn)生哺乳動物蛋白質(zhì)天然構(gòu)象和PTM的最佳選擇。 |
| 細胞類型 | E. Coli | Sf9, HighFive | TruExp? 哺乳動物表達系統(tǒng)(基于Human HEK293 suspension cells) |
| 表達水平 | 低-中-高 | 低-高 | 低-中-高 |
| 細胞增殖速度 | 快 (30 mins) | 慢 (18-24 hr) | 慢 (24 hr) |
| 費用 | $ | $ - $$$ | $ - $$$ |
| 耗時 | 3 周 | 6 - 8 周 | 3 - 6 周 |
| 翻譯后修飾 | |||
| 蛋白折疊 | Not reliable | Reliable | Reliable |
| 糖基化 | No | Simple | Complex |
| 磷酸化 | No | Yes | Yes |
| 乙酰化 | No | Yes | Yes |
| 酰化 | No | Yes | Yes |
| γ-羧基化 | No | No | Yes |
見證我們專有的TruExp?哺乳動物細胞基因表達系統(tǒng)的強大功能。
TruExp? 是RayBiotech最先進的哺乳動物細胞表達系統(tǒng)，用于生產(chǎn)具有天然構(gòu)象和PTM的重組蛋白。 TruExp? 對于高分子量或難以表達的蛋白質(zhì)來說，是一個很好的選擇。
我們推薦用 TruExp? 哺乳動物基因表達系統(tǒng)助您達成下列目標:
- 分泌型表達—表達的蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中（圖1），這有助于實現(xiàn)高純度水平（圖2）；與從高度污染的裂解液中回收蛋白質(zhì)相比，這種方法更為優(yōu)越。
- 復(fù)雜，包含豐富PTM的表達—例如，豐富的糖基化對于賦予蛋白質(zhì)功能至關(guān)重要（圖3）。
- 高表達量—典型的產(chǎn)量范圍是每升培養(yǎng)液可純化2-355毫克蛋白質(zhì)（表2）。
- 無生物危害風(fēng)險—無血清培養(yǎng)基和無動物源材料的使用消除了生物危害風(fēng)險。
圖1. TruExp哺乳動物細胞基因表達系統(tǒng)提供高水平的蛋白質(zhì)表達。六個不同的人類基因（H1-6）和三個小鼠基因（M1-3）通過TruExp表達系統(tǒng)進行了表達。將細胞培養(yǎng)上清液（10 μL）應(yīng)用于12% SDS-PAGE (A) 并通過抗His標簽單克隆抗體進行Western blot檢測 (B)。除了基因H6和M2外，所有過表達的基因均顯示出額外的分泌蛋白條帶 (A, 紅色箭頭)。所有基因均得到表達，部分顯示了豐富的翻譯后修飾，表現(xiàn)為與預(yù)測大小相比分子量增加 (B, 黃色箭頭)。M = 蛋白標準標記物 (kDa)。
圖2. 在TruExp哺乳動物細胞基因表達系統(tǒng)中表達的蛋白質(zhì)是全長且高度純化的。從轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞培養(yǎng)上清液中親和純化的重組蛋白顯示出高純度及完整的蛋白條帶，即使在分子量大于100 kDa的情況下也是如此。M = 蛋白標準標記物 (kDa)。
圖3. TruExp哺乳動物細胞基因表達系統(tǒng)中純化的重組蛋白的去糖基化分析。相同量的純化蛋白未經(jīng)處理（第2道）或在天然條件（第3道）或還原條件（第4道）下用去糖基化酶處理。去糖基化處理導(dǎo)致蛋白質(zhì)遷移率發(fā)生變化，產(chǎn)生了一個預(yù)期大小的單一降低條帶，這表明未經(jīng)處理的重組蛋白（第2道）是被糖基化的。第1道：蛋白標準標記物 (kDa)。第2道：未處理的蛋白。第3道：在天然條件下用去糖基化酶處理的蛋白。第4道：在變性條件下用去糖基化酶處理的蛋白。第5道：相同的切割反應(yīng)，但未加入蛋白。
表 2. RayBiotech TruExp哺乳動物細胞基因表達系統(tǒng)典型的重組人蛋白產(chǎn)量如下：
| Protein Abbreviated | Protein Name | Yield (mg/L culture) |
|---|---|---|
| SCCA2 | Serpin B4, Serpin Peptidase Inhibitor | 335.7 |
| Has | Human serum albumin | 330 |
| CT | Calcitonin | 160.8 |
| YWHAE | 14-3-3 Protein Epsilon | 103.1 |
| NT-proBNP | N-terminal of the prohormone BNP | 99.5 |
| NGAL | Lipocalin-2 | 69.1 |
| AFP | a-Fetoprotein | 63.2 |
| BNP-32 | Brain natriuretic peptide 32 | 51.2 |
| UBQN | Ubiquilin-1 | 41.3 |
| CEA | Carcinoembryonic Antigen | 39.8 |
| erbB-3 | Receptor Tyrosine-Protein Kinase erb-3 | 37.5 |
| EGFR | Epidermal Growth Factor Receptor | 23.5 |
| PGC | Pepsinogen II, Pepsinogen C | 18.6 |
| LAG-3 | Lymphocyte Activation Gene 3 Protein | 16.9 |
| Erb/Her2 | Receptor Tyrosine-Protein Kinase erbB-2 | 16.7 |
| HGF R | Hepatocyte Growth Factor Receptor | 14.6 |
| ANXA2 | Annexin A2 | 11.8 |
| GP73 | Golgi Membrane Protein 1 | 5.5 |
常見問題解答 我可以用自己的表達載體么？??
我的目標基因已經(jīng)存在于質(zhì)粒中。基因可以轉(zhuǎn)移到你的表達載體中嗎？
我可以不要His標簽換其他標簽或者完全去除標簽么？
